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全自動組織研磨機破碎酵母細胞實驗-上海凈信

2017-07-20 16:59:11 來源：

實驗地點：中科院生物物理所生物大分子國家重點實驗室
用戶：常文瑞組

實驗方法

1、破碎前的準備：

0.1g菌體（本實驗以0.1g菌體為例）；

直徑3號陶瓷珠；

研磨機（選用品牌上海凈信科技TS-24）；

預處理好的2ML研磨管；

模塊冷凍。

2、研磨：

0.1g菌體，5000r/min離心1 min后去上清，加入等體積的玻璃珠，加入0.5ML PBS溶液，放入預先冷凍好的模塊中，放入上海凈信科技的研磨機中，調(diào)整頻率為60Hz，震蕩時間60s.

注：破菌效率隨著液體體積的增加而增加，液體體積達到100ul時開始達到*大破菌效率。

附：陶瓷珠回收，以下是方法：

1、將含陶瓷珠的EP管，放置在大燒杯中，用自來水中浸泡2－3天。

2、用鑷子將陶瓷珠和細胞碎片等全部抖落到燒杯中。靜置待玻璃珠沉淀后，輕輕將上面懸浮的細胞碎片倒掉，在加水重懸陶瓷珠。

3、重復步驟2，4－5次直到所有的細胞碎片都去除干凈。

4、加入適量的濃硝酸（將陶瓷珠全部覆蓋即可），浸泡過夜。

5、去離子水洗三次，置烘箱中干燥即可。

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邵瓊女士

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